中央空调冷却水军团菌检测方法简介

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　　近些年冬天冷夏天热，空调的使用率大大增加，但要当心空调冷却水中的隐形杀手----军团菌。由军团菌引起的军团菌病是非典型肺炎的重要组成部分，是一种暴发流行或散发流行的严重呼吸道传染病，世人第一次认识军团病是在1976年7月，那时美国费城召开了第56届美国退伍军人年会，与会者中有182人发生肺炎，事后在病人肺组织中接种分离出一种致病菌，这种病菌来自旅馆的空调系统，以后医学界将这种病菌命名为嗜肺军团菌，把因这种病菌引起的疾病称为军团病。军团菌是一种水中的细菌，不仅存在于自然界水中，也存在于污染的水塔水、热水、矿泉水中。随着我国人民生活水平的提高，尤其是大型建筑物，如宾馆、医院公共设施等中央空调系统的使用日益普遍，军团病爆发流行的危险性也日益增加，因此了解和掌握空调冷却水中军团菌的检测方法，在预防和控制军团病的发生与流行中有十分重要的作用。现将其实验室检测方法作简单介绍。本文由永安昌盛中央空调维修网的小编转载于互联网。

　　一、 细菌培养和鉴定

　　1.样品处理：水样中的菌经过滤膜或离心浓缩，为减少杂菌生长，浓缩样品的一部分经酸处理与热处理，一部分不做处理，将上述处理与未处理样品分别接种GVPC琼脂平板，在5% CO2，35~36℃环境下培养7一lOd。

　　2.初步鉴定：军团菌的菌落颜色多样，通常呈白色、灰色、蓝色或紫色，也能显深褐 色、灰绿色、深红色。军团菌在GVPC选择性平板上可形成直径1～2 mm、灰白色、圆形、表面光滑、边缘清楚整齐的菌落，在紫外灯下，有荧光，为革兰氏阴性杆菌。在选择性平板上挑选可疑菌落，接种于BCYE琼脂平板和 BCYE-Cys平板进行传代培养，36±1℃培养至少 2d，凡在前者上生长而在后者上不生长的即为军团菌。

　　3.生化鉴定：常用的生化实验有糖发酵试验、淀粉水解试验、触酶试验、明胶液化试验、内酰胺酶试验、硝酸盐还原试验、尿素酶试验、马尿酸盐水解试验等。

　　二、分型鉴定：采用军团菌乳胶凝集试剂盒进行分型诊断，我国常见的型别有Lp1、Lp3、Lp5、Lp6、Lp9等。

　　三、PCR 法检测菌株特异系性基因：主要检测基因种类为军团菌属特异基因5sRNA、16sRNA和嗜肺军团菌种特异基因Mip基因。

　　四、其他检测方法：常用的方法有放射免疫法(R1A)、酶免疫法(EIA)、直接荧光抗体法(DFA)、免疫层析法(ICA)等多种方法;此外，核酸探针技术是近几年发展起来的一种快速诊断军团菌病原体的方法，根据军团菌的核酸序列合成一段寡核苷酸，用同位素标记，并与被检测核酸分子杂交，通过检测放射性信号，确定军团菌感染。这种方法具有特异性高，快速等优点。